Construită, conform unor atestări documentare, în timpul domniei lui Antonie Ruset, între anii 1677-1679, clădirea, care adăpostește secția de literatură veche, a fost sediul celei de a doua tiparnițe din Iași, în perioada 1679-1686. Biserica mănăstirii Trei Ierarhi, aflată în apropiere, a adăpostit prima tiparniță din Țara Moldovei, în perioada lui Vasile Lupu și a Mitropolitului Varlaam. Într-o primă fază, documentele semnalează clădirea ca făcând parte dintre anexele Curții domnești, după mutarea capitalei de la Suceava la Iași. Până în anul 1686, în această casă a funcționat tiparnița Mitropolitului Dosoftei. De sub teascurile acestei tiparnițe, adusă din Rusia cu sprijinul spătarului Nicolae Milescu,... au fost scoase la lumină cărți de o deosebită importanță pentru dezvoltarea limbii și literaturii române, precum: Dumnezeiasca Liturghie (1679), Psaltire de-nțăles a Sfântului Prooroc David (1680), Molitvenic de-nțăles (1681), Viața și petrecerea sfinților (1682-1686) și altele. În această clădire a fost organizată, în 1970, o expoziție reprezentativă pentru literatura română veche. Cu prilejul canonizării Mitropolitului Dosoftei (2005), numele muzeului a devenit „Sfântul Ierarh Dosoftei – Mitropolitul''. În cele două încăperi de la parter și una de la etaj a fost organizată o expoziție ilustrativă pentru dezvoltarea literaturii române din cele mai vechi timpuri și până în anul 1830, inclusiv cea cu caracter istoric.